核酸检测是怎样检测的
众所周知，新型冠状病毒肺炎（COVID-19）是一种烈性呼吸道传染病，其病原体为新型冠状病毒。若想证实已出现的感染症状是由本病毒所引起，最准确的方法是从患者体内分离出活病毒，并进行病毒培养。
然而，此方法并不适合大面积应用，在此次疑似病例的确诊工作中，也并不适用。这是因为病毒培养所需时间较长，需要的场所条件也很高（P3级实验室），时效性远远跟不上临床需要。
而核酸检测作为病原学的检测手段之一，效率很高，一般情况下几个小时就可以知道结果。因此，在此次疫情中，临床上取得病原学证据的主要方式并不是病毒培养，而是核酸检测。
核酸是遗传信息载体，是对DNA（脱氧核糖核酸）和RNA（核糖核酸）的统称。病毒则主要由遗传物质和蛋白质组成。而新型冠状病毒正是一种RNA病毒，其遗传物质是单链RNA。核酸检测的原理，正是检测在被测者的咽拭子等样本中，是否存在病毒的RNA。如果存在，说明被病毒感染。那么，我们是否已经获悉了病毒的RNA呢？
在武汉疫情初期，中国疾病预防控制中心应用宏基因组学技术，在短时间内完成该病毒的鉴定，并获取了全基因组序列。在病毒全基因组序列公布后，实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）试剂被快速研发。
随后，核酸检测试剂盒被应用于临床，并为确诊新冠肺炎提供病原学证据。那么，应用试剂盒进行核酸检测，究竟是怎样的一个过程呢？
首先，检测人员需要在试剂的帮助下，将样本中的核酸提取出来。再把已经分离出来的核酸加到核酸扩增试剂中，然后将其放到核酸扩增仪内，一般两个小时内就会有结果。
事实上，在操作步骤中，扩增是很重要的一环。扩增的意义在于能让微量的遗传信息成指数增加。只要样本中有核酸基因片段，就能用PCR法加以放大，从而更清晰地与病毒全基因组序列实现比对。
实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法已在临床实验室应用多年，检测体系成熟，具有特异性强、灵敏度高、检测周期短和可定量检测的优点，而且还能对病毒感染程度和治疗效果进行动态监测。
中日友好医院呼吸与危重症医学科主任医师陈欣在记者采访中介绍道：核酸检测十分敏感，只要在被检者的分泌物样本中找到一部分病毒的核酸，就可以通过RT-PCR扩增的方式，整合成序列。
"虽然不确定核酸是否来自于活病毒，但对于有呼吸道感染症状的患者或疑似患者来说，如果其咽拭子有这种核酸，一般认为来源于活病毒的一部分，间接证实其体内存在着病毒的繁殖和感染。" 陈欣告诉记者。
核酸检测容易出现"假阴性"
虽然核酸检测有灵敏度高、检测周期短等优点，但也存在着一定的弊端。不同于从人体内直接分离出活病毒的方式，核酸检测采用的是一种间接的方式，有可能造成假阴性。
因为试剂盒存在最低检测限的问题，所以只有当采到的样本中，病毒的含量达到一定程度时才能检测出来。少数情况下，可能康复者并未康复，但由于样本中病毒载量低，故康复者核酸检测的结果呈阴性，也就是我们常说的"假阴性"。
因此，在《新型冠状病毒肺炎诊疗标准（试行第七版）》中，出院标准之一为连续两次痰、鼻咽拭子等呼吸道标本核酸检测阴性（釆样时间至少间隔24小时）。
而之所以选取呼吸道标本进行核酸检测，是因为新冠肺炎属于呼吸道传染病，故而优先考虑从呼吸道的分泌物中取得标本。呼吸道又分为上呼吸道和下呼吸道，前者主要包括鼻、咽、喉；后者主要包括气管、主支气管及肺内各级支气管。
相应地，现在对疑似患者检测病毒核酸，标本的采集一般有两大类，上呼吸道标本和下呼吸道标本。
上呼吸道标本主要包括口咽拭子、鼻咽拭子（NPS）、鼻咽吸取物（NPA）；下呼吸道标本主要包括痰液、气管吸取物、支气管肺泡灌洗液（BALF）等。
核酸检测怎么操作？
核酸检测的做法，目前主要是通过取咽试子检测的方法。病毒在感染口腔黏膜上皮以后会寄居在口腔黏膜上皮，通过采咽拭子可以达到取样的目的。先嘱被检查者用淡盐水漱口，将口腔的杂菌清理，然后将标签贴于标本容器，告知被检查者取咽拭子培养的目的和方法，点燃酒精灯，嘱咐被检查者张口，发啊音，充分暴露咽喉部，用培养管内的消毒长棉签，以灵敏而轻柔的动作擦拭两侧腭弓和咽扁桃体上的分泌物。取样完毕后，将试管口在酒精灯火焰上进行消毒，将棉签插入试管内，塞紧并及时送检。核酸检测作为病原诊断的依据，是目前确诊的重要依据，比如对于目前新冠肺炎检测，病毒核酸检测仍然是确诊的金标准。
核酸检测是怎么做的？
核酸检测要用到试剂。
新冠肺炎核酸检测的原理，主要是依据每一个生物的核酸都是不一样的，都有特定的核酸序列以及DNA序列。病毒的特点就是形态非常之小，在普通的光学显微镜下是看不到的。但是可以根据每种病毒都有独特的基因序列来检测，只要检测出人体内有新冠病毒基因序列，并且采用荧光定量PCR的方法，把这个基因序列扩增后。如果是带有病毒的患者会检测出荧光信号增强，这样就可以显示阳性的结果。如果是核酸检测没有病毒的患者样本，因为没有靶基因的扩增，就检测不到荧光信号增强，这样的结果就属于新冠肺炎核酸检测阴性。
